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Megazyme木聚糖酶检测底物

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1.原理

该检测方法可用于特异性检测β-木聚糖酶的活力。用木聚糖酶孵育Azo-木聚糖,底物发生分解,产生低分子量染色片段,与乙醇形成反应混合物。离心去除高分子量产物,对上清液进行检测。木聚糖酶的活力可从标准曲线中获得。

 

2.底物

首先将桦木木聚糖纯化(去除淀粉),然后用蓝色染料R染色,1分子染料连接30分子糖基。

 

3.溶解

1g粉状底物加入到带加热板和磁力搅拌棒搅拌的80mL剧烈沸腾的水中,之后关闭热源,继续搅拌,直至多聚糖彻底溶解(约20min)。定容至100ml,加入0.02g叠氮互钠,并使其溶解。该溶液4℃下可保存12个月。使用前应振荡试剂瓶,该溶液是粘性的,应用容积式移液器移取(如Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip)。

 

4.沉淀剂溶液

工业甲基化酒精(IMS95%v/v)或乙醇(95%v/v)。

 


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