淀粉总量检测实际用到的方法包含哪些部分
淀粉可以看作是葡萄糖的高聚体。淀粉除食用外,工业上用于制糊精、麦芽糖、葡萄糖、酒精等,也用于调制印花浆、纺织品的上浆、纸张的上胶、药物片剂的压制等。可由玉米、甘薯、野生橡子和葛根等含淀粉的物质中提取而得。
淀粉是谷物碳水化合物的主要成分也是人和动物所需能量的重要来源。淀粉由于来源、组成及结构不同其在动物和人体内消化的速度和部位存在差异,如快速消化淀粉在小肠的前段即迅速消化而抗性淀粉(ResistantstarchRS)在小肠内几乎不降解,主要在大肠内依靠微生物发酵产生挥发性,脂肪酸。
1.标准曲线的制作
加入蒽酮试剂时,好将各管放在冷水中,并沿管壁缓缓加入,待全部加完后,再混匀。将以上标准管和样品管同时在100℃水浴中加热10min,取出自来水冷却,以空白作参比,在620nm波长下测其光密度,以光密度为纵坐标,以糖含量为横坐标,绘制标准曲线,并求出标准线性方程。
2.可溶性糖的提取
称取1g样品,加5ml80%乙醇,研磨成匀浆,80℃水浴中浸提10min,冷却,离心5min,重复浸提一次,离心5min合并以上离心后的上清液于25ml溶量瓶,用80%乙醇定容至刻度,沉淀备用测定淀粉。
3.显色测定
吸取样品提取液0.1ml,加1.9ml蒸馏水,再沿管壁缓缓加5ml硫酸-蒽酮试剂,待全部加完后混匀,在100℃水浴中加热10min,在100℃水浴中加热10min,以不加样液管为对照,在620nm波长下测其光密度。
4.计算
可溶性糖含量(%)={[查标准曲线(μg)×(样品液总体积/显色用样液体积)×稀释倍数]/样品(g)}×100
5.还原糖含量测定:取0.5ml稀释液(1ml提取液稀释至10ml),加入1.5ml蒸馏水,1.5ml3,5-二硝基水杨酸,混匀,沸水浴5min,冷水冷却,定容至25ml,用(53WBUV/VIS)分光光度计于520测定OD值。
6.淀粉的提取
沉淀加水2ml,沸水浴糊化15min,冷却后加9.2N高氯酸2ml,不时搅拌15min后加水2ml离心,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀加2ml4.6N高氯酸,不时搅拌15min后加水3ml离心10min,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀再加4ml水,离心10min,合并上清液并用蒸馏水定容。
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