一、使用技巧与操作规范
样本处理与储存
血清/血浆需离心去除沉淀，组织样本需匀浆后离心取上清，避免反复冻融（建议分装冻存于-20℃或-80℃）。
样本采集后应尽快处理，若需延迟检测，可加入含抗生素的培养基防止污染，并避免含磷酸酶抑制剂（如EDTA、氟化物）。
试剂准备与平衡
试剂盒从冷藏取出后，需室温平衡15-30分钟，确保温度均匀。稀释后的标准品不可保存，需现配现用。
不同批号试剂不可混用，底物B（如TMB）需避光保存，避免长时间暴露于光下。
加样与操作细节
使用校准过的移液器，加样时垂直悬空于孔上方，避免触壁或产生气泡。每步加样后需震荡混匀，确保反应均匀。
设立空白对照（无样本）、阴性对照（已知阴性样本）及阳性对照（已知阳性样本），以验证实验有效性。
温育与显色控制
严格按照说明书设定温育时间（如37℃避光30分钟）和温度，避免温度波动。显色阶段需严格避光，防止底物过早分解。
终止反应后需在10分钟内完成吸光度检测（如450nm波长），确保结果稳定。
洗涤与拍干技术
每孔洗涤液需甩干，避免残留影响结果。手工洗涤时，可用吸水纸轻拍孔壁，或使用自动洗板机提高效率。
避免将吸水纸直接插入孔内，防止划伤酶标板表面，影响后续检测。
数据分析与结果判定
通过标准品OD值建立标准曲线，扣除空白对照后计算样本浓度。若样本经过稀释，需乘以稀释倍数校正。
结合临床参考值范围（如成人血清ALP正常值40-150U/L）进行结果解读，异常值需复测验证。
二、碱性磷酸酶检测试剂盒关键注意事项
污染防控：全程穿戴防护装备（手套、口罩、实验服），使用一次性吸头，避免交叉污染。
设备校准：定期校准移液器、酶标仪，确保检测精度。
异常处理：若出现高背景值或假阳性，检查洗涤是否干净、试剂是否过期，或考虑样本基质干扰（如脂血样本需离心去脂）。
更新时间：2025-11-22
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