技术文章
当前位置:首页 > 技术文章 > 抗性淀粉检测对人健康的益处
抗性淀粉检测对人健康的益处
发布时间:2017-03-19   点击次数:662次
抗性淀粉检测对人健康的益处
 
抗性淀粉可以影响人和动物日粮中各种养分的消化与吸收,对人的健康有利。在延缓糖尿病人餐后血糖上升、肥胖控制、预防肠道疾病、降低血中胆固醇和能量消化率等具有重要的生理功能。
 
抗性淀粉检测原理(AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40)
样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振荡水浴孵育16小时,在这期间,通过两种酶的联合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育结束后,加入等体积的乙醇或工业甲基化酒精(IMS,变性乙醇)终止反应。离心上述溶液,收集上清勿弃,底部残留絮状团即为样品中的RS,用含水的IMS或乙醇(50%v/v)洗涤絮状团,洗涤后离心,再重复一次洗涤离心,收集离心后获得的上清,与之前收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体,将絮状团置于冰水浴中,加入2M KOH溶解,溶解的同时用磁力搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性,用AMG将淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂(GOPOD)测定,这也是对样品中RS含量的测定。非抗性淀粉(可溶性淀粉)的测定可通过集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。
 
抗性淀粉检测含量的方法,其步骤如下:    
①.取样:称取95-105mg样品于离心试管中;    
②.*次酶解反应:加胰α-淀粉酶反应液3.8-4.5ml,放入35-40℃的水浴恒温振荡器中水解,15-17小时后取出,加入3.8-4.2ml乙醇旋涡混匀,以2800-3100rpm的速度离心11-14分钟,弃上清液,再加入7-13ml乙醇,旋涡混匀,仍然以2800-3100rpm的速度离心10-13分钟,弃上清液;    
③.溶解抗性淀粉:向离心管中加入1.8-2.5ml氢氧化钾溶液,冰浴振荡16-21分钟,再加7.8-9ml醋酸钠缓冲溶液,摇匀;    
④.第二次酶解反应:加入淀粉葡萄糖苷酶液200-350U/ml,放入48-55℃水浴恒温振荡器中,26-31分钟后取出; 
⑤.测定:离心后,吸取100μl上清液于生化分析仪中测定葡萄糖,计算出抗性淀粉含量。
 
 
 
 
北京中检葆泰生物技术有限公司主营产品:青枯病试纸,李痘病毒试纸,转基因玉米试纸,马铃薯晚疫病试纸
北京中检葆泰生物技术有限公司版权所有   |    传真:86-010-84928982 GoogleSitemap
客服电话:
86-010-84928933
手机:
15810509925
  • 点击这里给我发消息