北京中检葆泰生物技术有限公司

 

抗性淀粉可以影响人和动物日粮中各种养分的消化与吸收,对人的健康有利。在延缓糖尿病人餐后血糖上升、肥胖控制、预防肠道疾病、降低血中胆固醇和能量消化率等具有重要的生理功能。

 

抗性淀粉检测原理（AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40）

样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振荡水浴孵育16小时，在这期间，通过两种酶的联合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成D-葡萄糖，孵育结束后，加入等体积的乙醇或工业甲基化酒精（IMS,变性乙醇）终止反应。离心上述溶液，收集上清勿弃，底部残留絮状团即为样品中的RS，用含水的IMS或乙醇（50%v/v）洗涤絮状团，洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体，将絮状团置于冰水浴中，加入2M KOH溶解，溶解的同时用磁力搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性，用AMG将淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂（GOPOD）测定，这也是对样品中RS含量的测定。非抗性淀粉（可溶性淀粉）的测定可通过集中的上清液并定容至100mL，再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。

 

抗性淀粉检测含量的方法，其步骤如下：　　　　

①．取样：称取９５－１０５ｍｇ样品于离心试管中；　　　　

②．*次酶解反应：加胰α－淀粉酶反应液３．８－４．５ｍｌ，放入３５－４０℃的水浴恒温振荡器中水解，１５－１７小时后取出，加入３．８－４．２ｍｌ乙醇旋涡混匀，以２８００－３１００ｒｐｍ的速度离心１１－１４分钟，弃上清液，再加入７－１３ｍｌ乙醇，旋涡混匀，仍然以２８００－３１００ｒｐｍ的速度离心１０－１３分钟，弃上清液；　　　　

③．溶解抗性淀粉：向离心管中加入１．８－２．５ｍｌ氢氧化钾溶液，冰浴振荡１６－２１分钟，再加７．８－９ｍｌ醋酸钠缓冲溶液，摇匀；　　　　

④．第二次酶解反应：加入淀粉葡萄糖苷酶液２００－３５０Ｕ／ｍｌ，放入４８－５５℃水浴恒温振荡器中，２６－３１分钟后取出；　

⑤．测定：离心后，吸取１００μｌ上清液于生化分析仪中测定葡萄糖，计算出抗性淀粉含量。