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根据检测原理的不同,目前常用的转基因植物检测技术主要有两大类:一类为蛋白水平的检测方法,如免疫试纸条法、蛋白质芯片和酶联免疫吸附法等; 另一类为核酸水平上的鉴定方法,如PCR以及PCR相关的检测技术,还有核酸杂交和基因芯片等方法。蛋白质水平的检测是基于所转的目的基因在转基因植株中得到了表达,通过检测这些蛋白的存在来确定转基因。由于这些鉴定方法只适用于新鲜的和未加工过的转基因材料,并且当转入的基因表达量低时也无法检测,因此这些方法并未得到广泛采用。DNA水平上的检测方法主要是基于PCR反应,但这些检测方法都需要热循环PCR仪,实验程序复杂并且检测时间较长,难以满足非实验室条件下的快速筛查和检测的需求。最近几年出现了恒温条件下的等温扩增技术,其中研究较热的一个技术就是环介导等温扩增法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。LAMP检测方法快速,能在恒温65℃下完成整个反应且实现了在反应管中肉眼对反应结果的判读,已经成功应用于转基因大豆的检测,但仍然需要恒温加热设备。
研发出的一种等温扩增技术,它能在37-42℃恒温条件下快速完成数十亿DNA扩增。RPA反应体系中主要包括重组酶(uvsX)、单链结合蛋白(Gp32)和链置换DNA聚合酶Bsu,其反应原理不同于体外DNA复制的PCR技术,重组酶uvsX在常温下就能打开DNA双链进行变性,因此不需要热循环PCR仪。RPA反应技术灵敏度高,反应快速,并且通过试纸条可以直接进行观察,方法简便易行。因此,本文的目的是建立一个转基因大豆的RPA快速检测技术,利用试剂条显色反应实现肉眼鉴定样品中是否含有转基因成分,并对日常接触到的大豆食品和种植的大豆进行初步应用。
美国Agdia公司转/基因玉米检测试纸条,美国*,灵敏度高,*,量大*,。
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检测项目 | 规格 | 货号 |
CP4EPSPS | 50条 | STX74000/0050 |
Bt-Cry1Ab/1Ac | 50条 | STX06200/0050 |
Bt-Cry3Bb1 | 50条 | STX06100/0050 |
Bt-Cry1Ac | 50条 | STX05203/0050 |
Bt-Cry1F | 50条 | STX10301/0050 |
Bt-Cry34Ab1 | 50条 | STX04500/0050 |
mBt-Cry3A | 50条 | STX06700/0050 |
Bt-Cry2A | 50条 | STX05801/0050 |
CspB | 50条 | STX35500/0050 |
NPT II | 50条 | STX73000/0050 |
Vip3A | 50条 | STX83500/0050 |
eCry3.1Ab | 50条 | STX49000/0050 |
Bt-Cry1F & Bt-Cry34Ab1 | 50条 | STX10900/0050 |
Bt-Cry1F, Bt-Cry1Ac & CP4 EPSPS | 50条 | STX 13200/0050 |
Bt-Cry1F, Bt-Cry2Ab2, Bt-Cry34Ab1 & Bt-Cry3Bb1 | 50条 | STX63200/0050 |
Bt-Cry2A, Bt-Cry1Ac & CP4 EPSPS (RR) | 50条 | STX51001/0050 |
Bt-Cry2Ab & Bt-Cry1Ab/1Ac | 50条 | STX06801/0050 |
CP4 EPSPS (RR) & Bt-Cry1Ab/1Ac | 50条 | STX74500/0050 |