烟草花叶病毒检测的作用和技术特征
更新时间：2023-03-26 点击次数：565次
烟草花叶病毒检测可在多种植物上越冬，也可附着在番茄种子上、土壤中的病残体上越冬，田间越冬寄主残体、烤晒后的烟叶、烟丝均可成为该病的初侵染源。主要通过汁液接触传染，只要寄主有伤口，即可侵入。黄瓜花叶病毒主要由蚜虫传染，此外用汁液摩擦接种也可传染。冬季病毒多在宿根杂草上越冬，春季蚜虫迁飞传毒，引致发病。番茄病毒病的发生与环境条件关系密切，一般高温干旱天气利于病害发生。此外，施用过量的氮肥，植株组织生长柔嫩或土壤瘠薄、板结、黏重以及排水不良发病重。番茄病毒的毒源种类在一年里往往有周期性的变化，春夏两季烟草花叶病毒比例较大，而秋季黄瓜花叶病毒为主。因此，生产上防治时应针对病毒的来源，采取相应的措施，才能收到较满意的效果。
烟草花叶病毒检测样品的收集、处理及保存方法：
1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃。
烟草花叶病毒检测试剂盒及检测方法，属于植物病毒检测技术领域。本发明的烟草花叶病毒定量检测试剂盒包括如下分装试剂和酶标板：所述酶标板为烟草花叶病毒抗体预包被酶标板；所述分装试剂为：样品稀释液，为磷酸盐缓冲液；洗涤液，含质量分数为0.1～0.5％的Tween?20的磷酸盐缓冲液；反应终止液，浓度为1.8～2.2mol/L的H2SO4溶液；酶标抗体工作液，辣根过氧化物酶标记的浓度为2μg/ml的特异性鼠抗烟草花叶病毒单克隆抗体；显色剂；烟草花叶病毒标准品。本发明的试剂盒能够实现烟草花叶病毒的定量检测，且快速、准确度高、灵敏度高。
