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烟草花叶病毒检测的作用和技术特征
更新时间:2023-03-26   点击次数:562次
  烟草花叶病毒检测可在多种植物上越冬,也可附着在番茄种子上、土壤中的病残体上越冬,田间越冬寄主残体、烤晒后的烟叶、烟丝均可成为该病的初侵染源。主要通过汁液接触传染,只要寄主有伤口,即可侵入。黄瓜花叶病毒主要由蚜虫传染,此外用汁液摩擦接种也可传染。冬季病毒多在宿根杂草上越冬,春季蚜虫迁飞传毒,引致发病。番茄病毒病的发生与环境条件关系密切,一般高温干旱天气利于病害发生。此外,施用过量的氮肥,植株组织生长柔嫩或土壤瘠薄、板结、黏重以及排水不良发病重。番茄病毒的毒源种类在一年里往往有周期性的变化,春夏两季烟草花叶病毒比例较大,而秋季黄瓜花叶病毒为主。因此,生产上防治时应针对病毒的来源,采取相应的措施,才能收到较满意的效果。
  
  烟草花叶病毒检测样品的收集、处理及保存方法:
  
  1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  
  2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
  
  3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  
  4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
  
  5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃。
  
  烟草花叶病毒检测试剂盒及检测方法,属于植物病毒检测技术领域。本发明的烟草花叶病毒定量检测试剂盒包括如下分装试剂和酶标板:所述酶标板为烟草花叶病毒抗体预包被酶标板;所述分装试剂为:样品稀释液,为磷酸盐缓冲液;洗涤液,含质量分数为0.1~0.5%的Tween?20的磷酸盐缓冲液;反应终止液,浓度为1.8~2.2mol/L的H2SO4溶液;酶标抗体工作液,辣根过氧化物酶标记的浓度为2μg/ml的特异性鼠抗烟草花叶病毒单克隆抗体;显色剂;烟草花叶病毒标准品。本发明的试剂盒能够实现烟草花叶病毒的定量检测,且快速、准确度高、灵敏度高。
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