早发现早处置，番茄溃疡病检测试纸条作用及操作规范

早发现早处置，番茄溃疡病检测试纸条作用及操作规范

番茄溃疡病是由密执安棒杆菌密执安亚种引起的毁灭性维管束细菌性病害，被列为重要检疫性病害，可侵染番茄幼苗、茎秆、叶片、果实，造成植株萎蔫枯死、果实鸟眼斑，严重时田块绝收，带菌种子和种苗是病害远距离传播的主要源头。传统PCR、分离培养等检测手段对设备、人员技术要求高，耗时久，很难直接在大棚、田间开展大批量初筛。番茄溃疡病检测试纸条（货号ISK44001/0025）作为胶体金免疫层析快速检测产品，无需专业仪器，5分钟即可获得初步检测结果，广泛用于温室、大田、种苗基地、基层植保站点的现场快速筛查，为病害早发现、早隔离、早处置提供技术支撑。  

一、产品主要作用  

第一，实现田间、温室现场快速初筛，降低病害扩散风险。该试纸条突破实验室条件限制，不需要离心机、PCR仪等大型设备，植保人员、种植技术人员可直接在种植现场采样检测。针对疑似萎蔫、茎秆开裂、维管束褐变、果实鸟眼斑的番茄植株，采集叶片、叶柄、茎秆组织，经过样本捣碎浸提后进行试纸检测，短时间判断植株是否存在Cmm病原菌，能够及时把带菌病株识别出来，尽早拔除销毁，阻断病菌雨水、农事操作传播，避免病害在棚室内爆发流行。尤其对于种苗繁育基地，可以对幼苗进行批量抽检，筛查隐性带菌的无症状种苗。Cmm存在潜伏期，部分植株携带病菌但暂时没有表现发病症状，传统肉眼观察很容易漏检，试纸条可以检出部分带菌但表观健康植株，从源头减少带病种苗流通风险，契合植物检疫预检需求。  

第二，适配多类型植物样品检测，拓展病害监测维度。试纸条检测样本包含番茄叶片、叶柄、茎秆、果柄等植株组织，也可以用于种子浸提液的初步筛查，兼顾成株、幼苗不同生育阶段样本检测。在病害调查工作中，可用于不同地块多点采样，快速对比不同棚室、不同品种发病带菌情况，为农户调整轮作、农事管理、消毒方案提供参考依据。在基层植保、农业技术推广工作中，降低检测门槛，普通农技人员经过简单培训就可以独立完成整套检测流程，提升一线病害监测效率。  

第三，作为实验室精准检测的前置筛选工具，节约检测成本。试纸条属于免疫快速筛查手段，阳性结果仅为推定阳性，不能直接作为仲裁判定依据，试纸阳性样品，再送实验室开展PCR、病原菌分离培养、致病性测定等确认试验；大量试纸阴性样本可直接排除，减少实验室样本处理数量，节省试剂、人力与时间成本，提升整体检测工作效率。  

需要明确，试纸条检测原理是识别病原菌胞外多糖抗原，不是直接检测完整菌体，存在一定交叉反应可能性，部分近缘棒状杆菌、土壤来源的少数杂菌可能出现非特异性阳性，所以它定位是初筛工具，不能直接替代标准实验室鉴定结果，不能单凭试纸阳性就大规模销毁种苗，需要进一步复核确认。  

二、使用注意事项  

（一）试纸储存与有效期管理  

试纸条需要妥善保存，未开封整套试剂建议2‑8℃冷藏储存；试纸的原装试剂管内部带有干燥剂，每次取用试纸之后，必须立刻拧紧管盖密封，防止试纸接触空气吸潮，受潮会造成线条模糊、结果失效，整管报废。短暂运输、短时间室温放置密封完好情况下，性能不受明显影响，但禁止长期高温暴晒存放。使用前核对产品有效期，超过有效期试纸禁止使用，过期试纸免疫抗体活性下降，会出现控制线不显现、假阴性等异常现象。不可以把不同批次试纸条混合使用，配套提取缓冲液、提取袋需要使用原厂配套耗材，更换其他缓冲液容易造成检测失败。  

（二）样品采集环节关键要点  

取样工具剪刀、刀片必须消毒，不同植株取样之间要做消毒处理，避免人为造成样本交叉污染，带来假阳性。优先选择病株维管束部位，茎秆样本选取节间褐变部位，叶片选取病健交界组织，不要选取干枯坏死的组织，坏死组织中病原菌已经大量降解，容易出现假阴性结果。采样后尽量尽快完成检测，样品不可长时间常温放置；如不能立刻检测，样品低温暂存，避免细菌大量增殖或者菌体死亡，影响检测准确度。采样要有代表性，病害存在植株体内分布不均现象，轻度发病植株病菌主要集中在下部茎秆，上部叶片有可能检测为阴性，怀疑发病时，建议同一植株采集茎、叶柄多部位重复检测，防止漏检。土壤沾附在叶片表面时，采样后尽量擦拭冲洗干净再提取，土壤中部分微生物会引发非特异性反应，造成可疑假阳性信号。  

（三）实验操作过程规范  

将植物样品放入专用提取袋内，隔着袋壁使用钝物充分碾压捣碎，使植物组织汁液充分释放到缓冲液中；试纸条只能把下端样品端垂直浸入提取液，浸入深度不能超过试纸标识的白色标线，浸入过深，液体漫过检测区，会直接导致测试无效，控制线不出现，整次检测作废。试纸保持垂直状态，不要平放、倾斜浸泡。严格把控判读时间，反应时间5‑15分钟读取结果；超出30分钟之后再观察出现的条线没有判读效力，试纸干燥后析出线条属于非特异性痕迹，不能作为阳性判定依据。  

结果判读规则：只出现上方控制线，检测线无条带，判定阴性；控制线、检测线同时出现条带，判定推定阳性；控制线没有出现，无论检测区有无线条，本次检测无效，需要更换试纸重新检测。  

（四）结果解读与后续处置注意事项  

试纸条阳性属于推定阳性，不等于确诊番茄溃疡病。出现阳性结果，应重新采集样本重复试纸检测，同时送实验室开展分子生物学或者分离培养确认试验，不能仅凭试纸结果直接作为检疫执法、大规模铲除植株的依据。试纸阴性也不能100%排除病害：当植株体内病菌浓度低于试纸检出下限、样品选取部位病菌少、样品坏死降解、操作失误等情况，都可能出现假阴性。高度怀疑田间发病，但试纸检测阴性时，应更换取样部位、重复多次检测，必要时送实验室复核。  

操作全程做好空白对照与阴阳性质控，条件允许时同步做阳性、阴性对照，判断试纸系统是否工作正常。实验完毕后，提取袋、残余病株样本按照病害废弃物处理，集中销毁，不要随意丢弃，防止人为扩散病原菌。  

（五）人员与安全注意事项  

操作人员操作前后做好手部清洁消毒，防止样本交叉污染；检测废弃物含原细菌，不可随意丢弃到大田环境。试纸仅供体外植物样本检测，不可用于人、动物样本检测。整套操作尽量避免强光直射，在散射光条件下判读结果，强光环境下容易看错条带，造成判读误差。  

三、总结  

番茄溃疡病Cmm检测试纸条优势就是快速便携，适配田间、温室现场大批量初筛，在番茄育苗、大田病害监测、产地预检中发挥重要作用，但它是免疫快速筛查产品，存在交叉反应、检出限限制，有固有的检测局限性。实际应用中严格遵守储存、采样、操作、判读全部注意事项，区分“推定阳性”和“确诊阳性”，初筛阳性样品务必开展实验室复核，将快速试纸筛查和传统实验室鉴定手段结合起来，才能够准确做好番茄溃疡病监测预警，科学指导番茄种植病害防控工作，减少溃疡病带来生产损失。