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膳食纤维检测的工作原理和使用时的操作方法
发布时间:2022-06-17   点击次数:435次
  膳食纤维检测是指碳水化合物及其相类似物质的总和,包括多糖、寡糖、木质素以及相关的植物物质。主要有纤维素、半纤维素、果胶及亲水胶体物质,如树胶、海藻多糖等组分;另外还包括植物细胞壁中所含有的木质素;不被人体消化酶所分解的物质,如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纤维素、黏质、寡糖以及少量相关成分,如蜡纸、角质、软木脂等。
  膳食纤维检测的操作方法
  1、试样制备试样处理根据水分含量、脂肪含量和糖含量进行适当的处理及干燥,并粉碎、混匀过筛。
  ①脂肪含量<10%的试样:若试样水分含量较低(<10%),取试样直接反复粉碎,至*过筛。混匀,待用。
  若试样水分含量较高(≥10%),试样混匀后,称取适量试样(mc,不少于50g),置于(70±1)℃真空干燥箱内干燥至恒重。将干燥后试样转至干燥器中,待试样温度降到室温后称量(MD)。根据干燥前后试样质量,计算试样质量损失因子(f)。干燥后试样反复粉碎至*过筛,置于干燥器中待用。
  ②脂肪含量≥10%的试样:试样需经脱脂处理。称取适量试样(mc,不少于50g),置于漏斗中,按每克试样25mL的比例加入石油醚进行冲洗,连续3次。脱脂后将试样混匀再进行干燥、称量(MD),记录脱脂、干燥后试样质量损失因子(f)。试样反复粉碎至*过筛,置于干燥器中待用。
  ③糖含量≥5%的试样:试样需经脱糖处理。称取适量试样(mc,不少于50g),置于漏斗中,按每克试样10mL的比例加入85%乙醇溶液进行冲洗,弃乙醇溶液,连续3次。脱糖后将试样置于40℃烘箱内干燥过夜,称量(MD),记录脱糖、干燥后试样质量损失因子(f)。干燥后试样反复粉碎至*过筛,置于干燥器中待用。
  2、酶解准确称取双份试样(m),约1g(至0.1mg),双份试样质量≤0.005g。将试样转置于400~600mL高脚烧杯中,加入0.05mol/LMES-TRIS缓冲液40mL,用磁力搅拌直至试样*分散在缓冲液中。同时制备两个空白样液与试样液进行同步操作,用于校正试剂对测定的影响。
  膳食纤维检测样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。
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