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马铃薯病毒检测实验的准备工作及样品的提取和稀释
发布时间:2019-11-23   点击次数:187次
   马铃薯病毒检测实验的准备工作及样品的提取和稀释
  马铃薯病毒检测的实验过程
  马铃薯病毒检测实验的准备工作
  实验前将抗体包被在微孔板上
  根据抗体标签上标识的稀释倍数,用1倍的包被缓冲液稀释抗体。混合均匀
  请根据使用量来确定抗体稀释液体积
  注意:1个反应孔需要100ul的抗体稀释液。1ml的抗体稀释液足够8个反应孔使用,10ml的抗体稀释液够96个反应孔使用。
  在聚乙烯材质的容器中制备抗体溶液。(避免抗体黏附的容器上)。抗体溶液准备好后需立即包被,否则抗体可能会部分失效。
  抗体稀释液不能存放,配制好后请立即使用。
  包被抗体
  在每个反应孔中加入100ul抗体稀释液
  孵育
  在恒湿箱中,室温下(25℃)孵育4小时或在4℃条件下过夜
  洗板
  孵育结束后,将反应孔中的试剂倒出
  加入250ul的1倍PBST缓冲液,之后快速倒出,重复4-8次
  将微孔板倒扣在吸水纸上以控干孔中残留液体
  马铃薯病毒检测样品的提取及稀释
  样品的提取
  尽可能选择出现症状的植物组织作为样品,通常将叶片作为ELISA实验的检测样品,其它植物组织也可用于ELISA实验
  在1个反应孔中加入多片叶片的提取液会使实验更经济一些,但却降低了实验的灵敏度。如对样品提取有任何疑义请与本公司联系
  若用研钵提取样品,在每份样品提取后请彻底清洗研钵,以免造成样品间的相互污染
  绝大多数样品,可使用通用样品提取缓冲液。但有些植物(葡萄、蓝莓等)必须使用特殊的提取缓冲液。如对样品提取缓冲液有任何疑义请与本公司联系
  样品的稀释
  样品研磨后,将样品提取液与提取缓冲液以1:10(样品提取液体积:提取缓冲液体积)的比例混合均匀。或以1:10(样品质量:提取缓冲液体积)的比例在提取缓冲液中研磨样品
  每个反应孔需要100ul的样品提取稀释液。多准备一些样品提取稀释液以利于吸取
  以上便是今天关于马铃薯病毒检测实验的准备工作及样品的提取和稀释的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
 
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